光谱分辨的NAD(P)H荧光寿命光谱学对心肌氧化代谢的评估

• 作者: Aneba S. Chorvat Jr.D. Chorvatova A. 乔建华 任明明 牛延艳 程颖
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸 自发荧光 光谱分辨的荧光寿命 线粒体 存活心肌细胞
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1191-1200
• 页数: 10页
• 分类号: R318.51|R329.2~+7
• 语种: 中文

摘要

应用光谱分辨的NAD(P)H荧光寿命光谱学研究心肌细胞线粒体氧化代谢状态,监测病理情况下线粒体功能改变的早期信号.研究将NAD(P)H作为无创荧光探针,用光谱分辨的时间相关单光子计数记录375 nm紫外光激发的心肌自发荧光(AF)光谱和寿命,测试影响NADH生产或线粒体呼吸时AF动态衰减.结果显示:在420～560 nm光谱区域,需用至少3个荧光寿命池0.4～0.7 ns、1.2～1.9 ns和8.0～13.0 ns描述细胞AF.酮体增加NADH水平,提高AF强度,但不改变荧光寿命.线粒体呼吸阻断剂Rotenone,显著增加AF 强度,缩短平均荧光寿命.氧化磷酸化解偶联剂(DNP),显著降低AF强度,在520 nm处增宽荧光光谱,延长平均荧光寿命.这些结果和NADH荧光动力学离体实验(in vitro)有可比性.研究证实光谱分辨的荧光寿命技术测定心肌NAD(P)H荧光有很好的重复性,增加了心肌氧化代谢或线粒体功能障碍在细胞水平上的知识,为临床诊断和治疗线粒体功能障碍开拓了新视野.