基因联合沉默抑制Hep-2细胞生长增殖的实验

• 作者: 王燕 肖伯奎 陈伟 陈始明 陈晨 陶泽璋 马伟
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉头颈外科
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 基因疗法 血管内皮生长因子 凋亡抑制蛋白质类 人端粒酶逆转录酶
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 喉癌的基础研究专题
• 页码范围: 123-127
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3617字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨应用RNA干扰技术同时沉默人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、Bcl-xl三个基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞生长增殖的影响,并与单独沉默hTERT基因对细胞的生长增殖作用进行比较.方法 构建表达hTERT mRNA特异的、含荧光素基因的shRNA(short hairpin RNA,短发夹RNA)真核表达质粒pshRNA1;根据hTERT、VEGF、Bcl-xl的cDNA序列构建串联表达3个shRNA序列的重组质粒pshRNA2.将上述质粒分别转染Hep-2细胞,MTT法观察Hep-2细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白印迹法检验蛋白表达.结果 pshRNA1、pshRNA2转染Hep-2细胞后,细胞增殖受到明显抑制,并诱导细胞凋亡.且pshRNA2对细胞的生长增殖抑制作用明显强于pshRNA1.pshRNA1转染细胞后hTERT蛋白表达下降,pshRNA2转染细胞后hTERT、VEGF、Bcl-xl蛋白表达均明显下降.结论 与单独沉默hTERT相比,同时沉默hTERT、VEGF、Bd-xl基因表现出更强大的抑制细胞增殖效应,多基因共沉默为喉癌的基因治疗提供了新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖伯奎	武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科	42	209	8.0	11.0
2	陈伟	武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科	89	485	12.0	18.0
3	王燕	武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科	100	541	13.0	19.0
4	陈始明	武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科	40	183	8.0	12.0
5	陈晨	武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科	67	236	8.0	13.0
6	马伟	武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科	3	7	2.0	2.0