猪源乙型脑炎病毒的分离鉴定及其E基因分析

• 作者: 张建武 袁世山 郑浩
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 乙型脑炎病毒 E基因 基因Ⅰ型
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 476-482
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5762字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.06.002

摘要

采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测猪流产胎儿病料中的乙型脑炎病毒(JEV),并对阳性病料做病毒分离与纯化.通过空斑减数试验测定了分离株和JEV P3株的中和指数.对分离株的prM-E基因进行克隆并测序,将推导的E蛋白序列与GenBank中登录的JEV毒株的E蛋白序列做比较分析.以E基因序列为基础,绘制进化树.结果显示,在检测的9份病料中有3份呈JEV阳性,并分离出1株JEV,命名为HEN0701.经测定,P3株的中和指数为12,分离株的中和指数为2.prM与E基因的序列分析表明,分离株与P3和Beijing-1株的同源性较低,最高仅为87.7%;而与JEV/sw/Mie/40/2004、KV1899、SH17M-07和YN79-Bao83株的同源性较高,最低为96.6%.进化分析表明,分离株属基因Ⅰ型.E蛋白序列分析结果显示,分离株与基因Ⅰ型JEV的E蛋白序列高度同源,且与SH-53、JEV/sw/Mie/40/2004和VN22/Viet Nam/2002/swine blood株的E蛋白序列完全相同,而与基因Ⅲ型JEV的E蛋白序列存在4个共同的氨基酸变异位点.