猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备

• 作者: 余风艳 张保新 沈红霞 王晓杜 赵凡凡 韩秀杰
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 动物学 日本乙型脑炎病毒 NS1 原核表达 纯化 抗体
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 396-400
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

猪Sus scrofa domestica日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是引起母猪繁殖机能障碍的重要病原之一,其NS1蛋白参与病毒复制和组装、调节宿主免疫反应功能.提取猪日本乙型脑炎上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增该病毒的NS1基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS1,转化大肠埃希菌Escherichia coli BL21 (DE3)菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS1蛋白,获得分子量大小为46 kDa的重组蛋白.为了提高表达量,JEV-NS1基因的958～1 245 bp被截短.聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明:JEV-NS1表达量明显提高,纯化后含量达到总蛋白的85％以上.纯化后的蛋白免疫ICR小鼠Mus musculus,制备了小鼠抗JEV-NS1多克隆抗体,western-blotting验证了JEV-NS1的抗原性和抗体的特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓杜	浙江农林大学林业与生物技术学院	20	68	4.0	7.0
2	沈红霞	浙江农林大学林业与生物技术学院	3	5	1.0	2.0
3	韩秀杰	浙江农林大学林业与生物技术学院	4	8	2.0	2.0
4	赵凡凡	浙江农林大学林业与生物技术学院	6	16	3.0	3.0
5	张保新	浙江农林大学林业与生物技术学院	4	9	2.0	2.0
6	余风艳	浙江农林大学林业与生物技术学院	3	5	1.0	2.0