NS2A序列对日本脑炎病毒NS1基因在原核系统中的体外表达的影响

• 作者: 仇华吉 周艳君 王云峰 田志军 童光志 金吉东
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 日本脑炎病毒 NS1 NS1′ RT-PCR 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 614-618
• 页数: 5页
• 分类号: S8
• 字数: 3700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2004.04.027

摘要

用RT-PCR扩增并克隆了日本脑炎病毒弱毒株SA14-14-2的NS1、NS1′、NS1-2A的cDNA片段,分别将其亚克隆到原核表达载体pET-30b(+),构建了重组原核表达质粒pET30b-NS1、pET30b-NS1′、pET30b-NS1-2A,转化大肠杆菌BL-21(DE3),用IPTG诱导培养.结果表明,仅有pET30b-NS1质粒转化的菌株获得表达,而另外2种重组质粒转化的菌株均无表达.表达的融合蛋白分子量约为46 kD,约占菌体总蛋白的30.8%,Western blotting分析表明表达产物具有抗原活性.动物试验证实,重组NS1免疫小鼠蛋白可以抵抗强毒的攻击.笔者研究证实NS2A或部分NS2A的存在对于NS1的表达具有不利影响.