细胞因子诱导的杀伤细胞体外培养技术的评价

• 作者: 刘晓东 张育葵 楼金星 瞿嵘 纪妍 胡碧川 谭晓华 郭智 陈丰 陈霞
• 来源期刊: 神经损伤与功能重建
• 学科: 医学
• 关键词: 杀伤细胞,淋巴因子激活 培养技术 标本制备
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 110-113
• 页数: 4页
• 分类号: R741|R733.41
• 字数: 2521字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/sjsscj.2009.02.027

摘要

目的:评价采用抗CD3单抗、IL-2、IFN-γ和IL-1α四因子培养体系体外培养细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)的效果.方法:采集8例难治性淋巴瘤患者外周血单个核细胞培养,于培养第1天加入抗人CD3单抗、人重组IL-1α、人重组IFN-γ,第2天加入人重组IL-2,每3天换培养液并添加人重组IL-2和人重组IFN-γ以维持其浓度,培养12～14 d收获CIK细胞.于培养第1、4、7、10、13 天进行细胞计数,于培养前及培养第13天测定细胞免疫表型.结果:细胞因子共刺激3 d即出现细胞集落,13 d 后CIK细胞总数达(7～18)×109(平均12.7×109),较培养前扩增44～140倍(平均98倍),细胞存活率超过90%;具有免疫表型CD3+、CD4+、CD8+和CD3+CD56+细胞的平均值分别从培养前的(50.9±3.5)%、(29.9±1.7)%、(41.3±3.2)%、(1.6±0.2)%增加到培养第13天的(90.2±1.6)%、(40.6±5.5)%、(52.8±4.9)%、(33.1±4.0)%.结论:培养当日加抗人CD3单抗、IL-1α、IFN-γ,24 h后加IL-2,培养过程中维持IL-2和IFN-γ浓度,这种四因子培养体系制备的CIK细胞的体外扩增率高、杀瘤活性强,并综合了外周血易获得、操作简便和自体来源等优点,可以临床推广应用.