THAP11转基因线虫载体的构建及转基因线虫的制备

• 作者: 任长虹 李长燕 杨帆 杨晓明 汪思应 赵娜
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 动物 基因修饰 遗传载体 新小杆线虫 漂亮
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 661-665
• 页数: 5页
• 分类号: R-332|R383.19|R394
• 字数: 4267字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2009.06.001

摘要

目的 构建带有线虫组织特异启动子的含不同ployQ的THAP11转基因线虫载体,并制备转基因线虫,为进一步研究THAP11基因的功能提供基础.方法 设计引物,以THAP11-pcDNA3.1 his/mycB真核表达载体为模板,PCR法扩增含不同ployQ的THAP11基因,将其克隆至带有线虫组织特异性启动子的pFx-unc119(Gene Marker dsRed)载体.酶切及测序鉴定正确后,用显微注射的方法 制备THAP11转基因线虫,用荧光显微镜观察载体荧光表达并提取转基因线虫基因组DNA、RNA,PCR、RT-PCR方法 检测其整合及表达情况.结果 PcR扩增出含不同ployQ的THAP11-HIS片段,长度约1000 bp,测序正确并构建pFx-uncll9(THAP11)载体THAP11转基因线虫的载体在线虫体内稳定表达红色荧光,转基因线虫基因组内有相应的THAP11插入及转录.结论 成功构建的THAP11转基因线虫的载体能稳定转染线虫,将有助于THAP11功能的进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨帆	安徽医科大学病理生理学教研室	4	7	1.0	2.0
3	杨晓明	军事医学科学院放射与辐射研究所	88	536	11.0	19.0
6	任长虹	军事医学科学院放射与辐射研究所	14	90	6.0	9.0
7	汪思应	安徽医科大学病理生理学教研室	131	558	11.0	15.0
8	李长燕	军事医学科学院放射与辐射研究所	23	130	5.0	11.0
9	赵娜	军事医学科学院放射与辐射研究所	3	6	1.0	2.0