冈田酸所致微管相关蛋白tau Ser396位点过度磷酸化抑制细胞凋亡

• 作者: 左斌 张敏海 徐桂香 李宏莲 汪薇曦 沈建英 甘辉 肖娟娟
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 阿尔茨海默病 tau蛋白 磷酸酯酶PP-2A 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 281-285
• 页数: 5页
• 分类号: R749.1
• 字数: 3702字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2009.03.001

摘要

目的 探讨磷酸酯酶活性降低致tau过度磷酸化与细胞凋亡的关系.方法 稳定表达人tau eDNA的鼠成神经瘤细胞(N2a/tau)分3组.对照组不处理;十字孢碱(staurosporine,STP,凋亡诱导剂)处理6 h为STP组;用磷酸酯酶PP-2A的抑制剂冈田酸(okadaic acid,OA)处理4 h,再用STP处理6 h为OA+STP组.流式细胞仪检测凋亡率,免疫印迹检测Ser396位点磷酸化tau(Ser396 p-tau)和总tau的表达,免疫荧光双标检测Ser396 p-tau的阳性产物与活化的半胱氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase-3)阳性产物的共定位关系.结果 ①凋亡率:对照组为(4.37±1.47)%,STP组为(19.84±3.25)%,OA+STP组为(12.12±2.46)%;②免疫印迹:OA+STP组Ser396 p-tau的表达明显高于另两组,总tau表达组间无差异;③免疫荧光双标:进一步印证免疫印迹结果,且3组均显示活化的Caspase-3和Ser396 p-tau阳性产物大多不共定位于相同细胞.结论 PP-2A活性降低所致tau Ser396位点的过度磷酸化可抑制细胞凋亡,结合前期的实验进一步明确特殊位点过度磷酸化的tau可抑制细胞进入快速的凋亡程序.