带PTD的小鼠Foxp3 PRD缺失突变体对小鼠脾混合淋巴细胞反应的影响

• 作者: 刘静 宗杨勇 彭鑫 申卫红 许逊 邵启祥
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白转导结构域 ΔPRD Foxp3 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1224-1230
• 页数: 7页
• 分类号: R392.4
• 字数: 4791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-7347.2009.12.011

摘要

目的:构建和表达带蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD)的Foxp3(forkhead box P3)PRD缺失突变体(PTD-ΔPRD)融合蛋白,并探讨其对脾混合淋巴细胞反应的影响.方法:应用PCR技术扩增获得小鼠ΔPRD片段核酸序列,将其分列插入到带PTD的pET28a-PTD和pET28a-PTD-eGFP原核表达载体中,并在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中表达融合蛋白,利用镍柱获得并复性融合蛋白;Western印迹鉴定目的蛋白表达的正确性、流式细胞术和Western印迹检测融合蛋白穿膜进入小鼠T淋巴细胞瘤株EL-4细胞中的能力、双向混合淋巴细胞反应分析融合蛋白对T淋巴细胞增殖的影响.结果:融合蛋白可在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中表达,并获得了大量纯化的融合蛋白.流式细胞术和Western印迹显示融合蛋白穿越细胞膜进入EL-4细胞核中,混合淋巴反应初步证明融合蛋白具有抑制T淋巴细胞增殖的功能.结论:成功表达小鼠PTD-ΔPRD Foxp3融合蛋白,该融合蛋白能有效进入细胞核内,抑制T淋巴细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵启祥	江苏大学基础医学与医学技术学院	78	336	9.0	14.0
2	刘静	江苏大学基础医学与医学技术学院	17	83	5.0	8.0
3	彭鑫	江苏大学基础医学与医学技术学院	4	10	3.0	3.0
4	申卫红	无锡市第三人民医院检验科	5	7	2.0	2.0
5	许逊	江苏大学基础医学与医学技术学院	3	2	1.0	1.0
6	宗杨勇	江苏大学基础医学与医学技术学院	1	0	0.0	0.0