HIV-1 gp120蛋白对人血-视网膜屏障细胞的毒性作用

• 作者: 余秋蓉 张振平 晏丕松 林浩添 柏凌 汪琪璘
• 来源期刊: 中华生物医学工程杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV包膜蛋白质gp120 血视网膜屏障 细胞毒性实验 细胞凋亡 获得性免疫缺陷综合征
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-26
• 页数: 7页
• 分类号: R9
• 字数: 6542字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2009.01.005

摘要

目的 探索HIV-1 gp120蛋白侵犯人血.视网膜屏障的机制.方法 原代培养人血-视网膜屏障细胞(HBRBC),包括人视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)、人视网膜微血管周细胞(HRCPC)、人视网膜色素上皮细胞(HRPE),以培养基作为对照.用MTT法观察7种不同浓度(0.01～0.15 mg/L)的HIV-1 gp120蛋白作用24 h和0.08 mg/L HIV-1 gp120蛋白作用不同时间(4～72 h)对3种细胞的生长抑制作用.0.08、0.1、0.12、0.15 mg/L的HIV-1 gp120蛋白作用24 h后,用流式细胞仪检测其对3种细胞凋亡率和线粒体膜电位(△ψm)的影响;用Western免疫印迹检测Cleaved cagpase-9蛋白的活化情况.用透射电镜观察经0.08 mg/L HIV-1 gp120蛋白处理24 h前后3种细胞超微结构的变化.结果 HIV-1gp120蛋白作用24 h,低浓度(<0.08mg/L)对3种细胞的活性均没有明显影响,而当浓度超过0.08mg/L时,对细胞的增殖活性有明显的抑制作用,呈浓度依赖性(HRCEC:r=-0.763,P<0.01;HRCPC:r=-0.804,P<0.01;HRPE:r=-0.698,P<0.01).HIV-1 gp120蛋白(0.08mg/L)作用12 h即可显著抑制细胞的增殖活性.24、48和72 h抑制效应更明显,相对增殖率分别为HRCEC:84%、70%、41%、22%,HRCPC:80%、69%、38%、18%,HRPE:86%、73%、45%、26%,抑制效应呈时间依赖性(HRCEC:r=0.833.P<0.01;HRCPC:r=-0.784,P<0.01;HRPE:r=-0.701,P<0.01).HIV-1 gp120蛋白作用24 h后与对照组相比,各浓度组3种细胞凋亡率增加、△ψm明显降低以及Cleaved cagpase-9蛋白表达增强,均呈浓度依赖性.透射电镜示0.08mg/LHIV-1 gp120蛋白处理24h后,3种细胞均出现了线粒体肿胀、溶酶体增多等早期凋亡的微观改变.结论 HIV-1 gp120蛋白能够抑制人血-视网膜屏障细胞的增殖并具有诱导凋亡的作用,破坏线粒体的结构和功能是其可能的机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余秋蓉	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	3	28	2.0	3.0
2	林浩添	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	25	86	5.0	8.0
3	张振平	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	23	210	8.0	14.0
4	晏丕松	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	4	19	2.0	4.0
5	汪琪璘	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
6	柏凌	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0