HIV-1 C亚型密码子优化gp120基因重组腺病毒载体的构建及表达

• 作者: 庞伟 张高红 王路 白雪 郑永唐
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: HIV-1 密码子优化 gp120基因 腺病毒 载体构建与表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 397-400,405
• 页数: 5页
• 分类号: Q7
• 字数: 3373字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.05.005

摘要

目的 构建含有HIV-1 C亚型gp120基因重组腺病毒载体,并在293细胞中表达gp120蛋白.方法 PCR扩增,获得HIV-1 C亚型gp120片段,定向克隆入腺病毒转移载体pTrack-CMV,线性化后转化至含有腺病毒骨架载体pAd-easy-1的大肠埃希菌BJ5183,获得重组子prAd-gp120,PacⅠ酶切纯化后转染293细胞,包装成复制缺陷型重组腺病毒vAd-gp120.结果 经PCR、酶切及DNA测序,插入片段大小、方向正确,获得了具有感染力的vAd-gp120重组腺病毒;通过Western 印迹检测,重组腺病毒在293细胞中表达出分子量为120 kD的蛋白.结论 成功构建了含有HIV-1 C亚型gp120基因重组腺病毒载体,并获得该基因的表达.