抗HIV-1 gp120单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控型表达载体构建及表达

• 作者: 张立树 徐一鸣 江文正 王宏 连海 金宁一 金洪涛
• 来源期刊: 高技术通讯
• 关键词: HIV gp120 单链抗体 金黄色葡萄菌外毒素A 表达
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 生物与现代农业技术
• 页码范围: 38-41
• 页数: 4页
• 字数: 2832字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2004.11.008

摘要

人工合成了能广泛识别HIV-1 gp120的单链抗体(ScFv120)基因和金黄色葡萄菌外毒素A(SEA)基因,将SEA基因第 227位编码Asp(D)的密码子GAT转换成编码Ala(A)的密码子GCT,并对两基因进行密码子优化.构建原核温控型表达质粒pBV-120和pBV-SL120,经条件优化,pBV-120 和pBV-SL120分别在E.coli BL21(DE3)plys中44℃诱导6h、42℃诱导7h获得最佳表达,表达量分别占菌体总蛋白的27.673%和 32.519%.目的蛋白经包涵体洗脱、分子筛层析折叠复性后可与HIV-1抗原条发生良好的结合反应.