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指甲游离缘及毛发中核DNA抽提方法的探讨
指甲游离缘及毛发中核DNA抽提方法的探讨
作者:
安宇
张弘
段文元
王红艳
陈虹帆
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
核DNA抽提
指甲游离缘
发根
发干
摘要:
目的 探讨指甲游离缘及毛发中抽提核DNA的方法,并对抽提结果进行评估.方法 采集5名健康成人志愿者指甲游离缘、发根及发干样本各30份.分别用无水乙醇和蒸馏水浸泡样本,去除外源性DNA.每份指甲游离缘样本为3 mg指甲游离缘碎片;每份发根或发干样本各为3段0.3~0.5 cm发根或发干.分别采用酚氯仿法、Chelex-100法和QIAamp(R) DNA Investigator试剂盒法抽提3种样本的核DNA,并运用PCR扩增对抽提DNA进行评估.扩增片段位于不同染色体上,长度分别为188、248、300和741 bp.PCR扩增产物用1.8%琼脂糖凝胶电泳检测.为探讨样本量对抽提结果的影响,任意取指甲游离缘1、3和5 mg,发根及发干各1、3和5根重复实验,并比较结果.初步探讨增加Taq酶量对黑色素抑制的消除作用.结果 在3种抽提方法中长度为248 bp的引物扩增成功率均为最高.指甲游离缘样本使用试剂盒法抽提核DNA PCR扩增成功率显著高于酚氯仿法及Chelex-100法(P<0.05).发干样本使用试剂盒法抽提核DNA PCR扩增成功率显著高于酚氯仿法(P<0.05).发根样本3种方法抽提核DNA PCR扩增成功率差异无统计学意义(P>0.05).指甲游离缘样本的PCR扩增成功率显著高于发根及发干样本(P<0.05),发根和发干样本的PCR扩增成功率差异无统计学意义.试剂盒法抽提指甲游离缘、发根和发干核DNA PCR扩增成功率随样本量增加而提高.酚氯仿法和Chelex-100法抽提发根或发干样本核DNA PCR扩增成功率随样本量增加呈下降趋势,提示可能存在黑色素抑制作用.增加Taq酶量对于消除黑色素抑制有一定作用.结论 ①3种抽提方法均能成功从指甲游离缘及毛发中抽提到核DNA,试剂盒法成功率最高.②指甲游离缘、发根和发干均可作为核DNA采样源,从指甲游离缘抽提DNA成功率最高.
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文献信息
篇名
指甲游离缘及毛发中核DNA抽提方法的探讨
来源期刊
中国循证儿科杂志
学科
关键词
核DNA抽提
指甲游离缘
发根
发干
年,卷(期)
2009,(5)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
431-435
页数
5页
分类号
字数
5177字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1673-5501.2009.05.006
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
安宇
复旦大学生物医学研究院
12
70
5.0
8.0
2
张弘
复旦大学遗传所遗传工程国家重点实验室
8
39
4.0
6.0
3
段文元
复旦大学遗传所遗传工程国家重点实验室
13
87
4.0
9.0
5
王红艳
复旦大学遗传所遗传工程国家重点实验室
14
18
2.0
3.0
9
陈虹帆
复旦大学遗传所遗传工程国家重点实验室
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指甲游离缘
发根
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研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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中国循证儿科杂志
主办单位:
复旦大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1673-5501
CN:
31-1969/R
开本:
大16开
出版地:
上海市万源路399号
邮发代号:
4-394
创刊时间:
2006
语种:
chi
出版文献量(篇)
1504
总下载数(次)
4
总被引数(次)
11743
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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