甜瓜半粒干种子DNA提取方法的优化

• 作者: 夏玲 杨小锋 梁昕景 王学林
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 甜瓜 干种子 DNA提取 CTAB法 优化
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 1426-1431
• 页数: 6页
• 分类号: S652.036
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2019.07.04

摘要

[目的]优化甜瓜半粒干种子DNA提取方法,为甜瓜相关分子研究提供技术支持.[方法]以甜瓜半粒干种子为材料,比较改良CTAB法、SDS法、高盐低pH法和尿素法4种提取方法的DNA提取效果,并对改良CTAB法中的提取液CTAB浓度、裂解时间、苯酚抽提次数等进行优化,以琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计分别检测DNA的质量和纯度.最后通过SSR分析验证优化后改良CTAB法提取DNA的效果.[结果]4种提取方法中,改良CTAB法提取的DNA提取率最高,且DNA质量和纯度均高于其他提取方法.优化得到改良CTAB法的最佳提取条件为:提取液CTAB浓度2％,裂解时间20 min,苯酚抽提1次[先用苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)抽提1次,再用氯仿/异戊醇(24:1)抽提1次].在此条件下,提取的甜瓜半粒干种子DNA质量和纯度较好,以此为模板进行SSR分子标记分析时,电泳条带稳定、清晰,基本无杂带,可清楚区分品种间的差异.[结论]优化后的改良CTAB法提取甜瓜半粒干种子DNA效果较好,可满足甜瓜种子分子标记和遗传多样性分析等分子实验需求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨小锋		62	107	6.0	7.0
2	王学林		10	5	1.0	2.0
3	夏玲		6	0	0.0	0.0
4	梁昕景		5	0	0.0	0.0