bFGF基因转染对兔骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

• 作者: 匡世军 张志光 苏凯 蒋柳宏 郑有华
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 碱性成纤维细胞生长因子 基因转染 组织工程
• 年，卷（期）: 2009,（z2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 41-46
• 页数: 6页
• 分类号: R782.2
• 字数: 4529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2009.z2.009

摘要

[目的]探讨作为组织工程种子细胞的骨髓间充质干细胞(BMSCs),在体外培养条件下bFGF基因转染对其生物学特性的影响.[方法]穿刺抽取新西兰大白兔胫骨骨髓,采用密度梯度离心法分离BMSCs,在采用贴壁筛选法对分离出的BMSCs进行纯化.将DH-5α菌(含牛bFGF-pcDNA3真核表达载体)扩增,用UNIQ-10柱式质粒小量抽提试剂盒抽提质粒,并对所提取的bFGF-pcDNA3重组表达质粒酶切鉴定.利用脂质体转染bFGF-pcDNA3到BMSCs,G418筛选获得抗性克隆.采用免疫组化、Western blot检测、MTT法检测和流式细胞仪检测转染bFGF的骨髓基质干细胞表达bFGF蛋白、细胞的增殖情况和细胞周期.[结果]密度梯度离心法和贴壁筛选法,获得大量形态均一的BMSCs,部分细胞经成骨诱导培养后,Von kossa染色可见黑色结节.脂质体介导bFGF-pcDNA3重组表达质粒转染BMSCs,经免疫组化和Western blot检测,证实转染细胞确实表达bFGF,并且表达部位在胞浆.转染细胞增值活力加强,生长曲线上移,处于增殖周期的细胞比例加大(P<0.05).[结论]用脂质体转染法能将bFGF-pcDNA3重组真核表达载体成功导人体外培养的BMSCs,筛选得到稳定表达bFGF的BMSCs细胞株,自身表达的bFGF可以促进BMSCs增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑有华	中山大学光华口腔医学院口腔颌面外科	36	173	8.0	10.0
2	匡世军	中山大学光华口腔医学院口腔颌面外科	24	125	6.0	9.0
3	苏凯	中山大学光华口腔医学院口腔颌面外科	38	146	6.0	9.0
4	张志光	中山大学光华口腔医学院口腔颌面外科	86	375	11.0	13.0
5	蒋柳宏	广州中医药大学第一附属医院口腔科	12	88	5.0	9.0