共转染CDK1、CDK2 siRNA对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响

• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞周期依赖性蛋白激酶 细胞周期阻滞 肿瘤细胞凋亡 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 473-478
• 页数: 6页
• 分类号: R34
• 字数: 4288字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.06.001

摘要

目的 研究共转染CDK1、CDK2 siRNA同时抑制CDK1、CDK2蛋白表达对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响,探讨细胞周期主要调控分子在肿瘤细胞凋亡中的作用.方法 以人宫颈癌细胞株HeLa细胞为研究对象,用脂质体lipofectamine2000同时转染CDK1 和CDK2 siRNA.在转染后48、60 h收集细胞,用Western印迹检测CDK1、CDK2蛋白的表达,AnnexinV/PI检测转染细胞的凋亡,流式细胞术DNA含量检测分析细胞周期.转染细胞进行瑞氏-姬姆萨染色(Wright-Giemsa)后在显微镜下观察其形态变化.结果 共转染CDK1、CDK2 siRNA后48和60 h,Western 印迹结果显示CDK1和CDK2蛋白的表达都同时降低.共转染CDK1、CDK2 siRNA后,细胞周期S期和G_2/M期比例与对照相比有明显增加;共转染细胞经瑞氏-姬姆萨染色后在显微镜下可见双核或多核细胞增多;AnnexinV/PI检测结果显示共转染CDK1、CDK2 siRNA的细胞在48和60 h细胞凋亡率与对照相比有显著的升高.结论 siRNA 干扰导致的CDK1、CDK2表达同时降低不仅导致细胞周期S期和G_2/M期的阻滞,也诱导了肿瘤细胞的凋亡.