靶向β-catenin的shRNA抑制结肠癌细胞增殖的体外实验研究

• 作者: 兰平 彭慧 汪建平 谭敏 马晋平 黄文生
• 来源期刊: 中华胃肠外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠肿瘤 β-catenin RNA干扰
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 301-305
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4387字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0274.2009.03.028

摘要

目的 探讨靶向β-catenin的shRNA对结肠癌细胞Colo205的WNT通路的阻断和该基因沉默效应对结肠癌细胞在体外的生长抑制作用.方法 构建靶向β-catenin的shRNA载体质粒和阴性对照载体,然后分别转染入结肠癌细胞Colo205.用RT-PCR和Western印迹法检测β-catenin的mRNA和蛋白的表达情况,细胞免疫荧光染色法检测β-catenin蛋白的表达.噻唑蓝实验评价转染后各组细胞的体外增殖情况.软琼脂集落形成实验检测各组细胞的非锚着依赖性生长的能力.结果 成功构建了靶向β-catenin的shRNA和阴性对照质粒载体.特异性靶向β-catenin的shRNA能够明显下调β-catenin mRNA,并抑制β-catenin蛋白的表达,其抑制率分别为47.89%和45.26%(P<0.05).转染了特异性shRNA的实验组(CAT组)细胞增殖在转染后呈现随时间延长而进行性抑制的现象.在转染后72 h,CAT组的细胞存活率为48.5%,与空白对照组的91.3%相比明显降低(P<0.05).在软琼脂里CAT组的细胞克隆数目(9个)明显少于空白对照组(46个)和阴性对照组(43个)(P<0.05).结论 靶向β-catenin的特异性shRNA对结肠癌Colo205细胞具有沉默β-catenin基因表达从而阻断WNT信号通路的作用,并且能够有效地在体外抑制结肠癌细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马晋平	中山大学附属第一医院外科	80	170	9.0	10.0
2	谭敏	中山大学附属第一医院外科	74	356	10.0	14.0
3	黄文生	中山大学附属第一医院外科	44	99	6.0	8.0