Resistin基因过表达对大鼠胰岛β细胞株 RINm5F基础胰岛素分泌的影响

• 作者: 刘峰 季晨博 张春梅 赵亚萍 邱洁 郭锡熔 陈小慧 陈荣华 高春林
• 来源期刊: 实用儿科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Resistin 胰岛β细胞 胰岛素分泌
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 内分泌遗传代谢性疾病
• 页码范围: 577-579
• 页数: 3页
• 分类号: R725.8
• 字数: 2471字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨Resistin基因过表达对大鼠胰岛β细胞株 RINm5F基础胰岛素分泌的影响.方法 体外培养大鼠胰岛β细胞株 RINm5F,采用PCR法扩增大鼠Resistin基因全编码区cDNA片段,BamH和Xho双酶切后插入pcDNA3.1B 表达载体,经测序验证正确后,采用脂质体转染pcDNA3.1-Resistin真核表达质粒入RINm5F细胞,筛选稳定表达株,并采用RT-PCR验证过表达Resistin的效率.在RINm5F细胞密度达到80%,缓冲液洗3遍,继续于缓冲液中生长2 h,收集上清液,采用ELISA法检测细胞培养上清中的胰岛素水平.同时Trizol 一步法提取RINm5F细胞总RNA,采用RT-PCR法检测葡萄糖转运子2(Glut2)mRNA水平,并用紫外吸收剂凝胶密度扫描仪分析条带吸光度值.采用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 观察过表达Resistin的RINm5F中Resistin mRNA表达,发现过表达Resistin的细胞株中Resistin mRNA水平为对照组的2.46倍(P<0.001).过表达Resistin的RINm5F细胞的基础胰岛素分泌低于转染空载质粒的细胞,较对照组下降约32%(P<0.001).过表达Resistin的RINm5F细胞中Glut2表达明显低于转染空载质粒的细胞,较对照组下降约38%(P<0.05).结论 Resistin基因过表达显著下调胰岛庀赴鸕INm5F的基础胰岛素分泌,其机制可能与Glut2有关.