双向电泳联合免疫印迹技术分析日本血吸虫成虫可溶性抗原

• 作者: 余轶婧 吴赟 沈继龙 罗庆礼 郑辉 钟政荣
• 来源期刊: 临床输血与检验
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 蛋白质组学 成虫特异性抗原 双向电泳 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 107-112
• 页数: 6页
• 分类号: R532.21|R446.61
• 字数: 5341字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2009.02.04

摘要

目的 建立及优化日本血吸虫成虫的蛋白质组学分析方法,寻找可溶性蛋白组分中与免疫应答相关的特异性成虫抗原.方法纯化日本血吸虫成虫可溶性蛋白,应用双向电泳(2D-E)结合免疫印迹技术(Western blotting),获得相应的电泳图谱和免疫印迹图谱,应用PDQuest 8.0双向电泳图像分析软件对图像进行分析比对,鉴别特异性抗原.结果血吸虫成虫可溶性蛋白经双向电泳后,考马斯亮蓝G250染色,电泳图谱显示约152个主要蛋白斑点.分子量(Mr)分布约为14～114 kD;等电点(pI)主要集中在4.9～9.5.进一步的Western blotting鉴定结果显示:实验组图像可见的抗原抗体反应点数目约57个,对照组为0.结论双向电泳联合免疫印迹技术是成功分析蛋白质组学的技术关键,该技术为寻找日本血吸虫特异性抗原开辟了新途径.