可溶性重组日本血吸虫26 kDa GST的优化表达

• 作者: 余光清 李雍龙 蒋诗琴
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 日本血吸虫谷胱甘肽S-转移酶 蛋白表达 正交设计 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 770-773
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3618字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.08.021

摘要

目的 探讨在大肠杆菌中表达可溶性重组日本血吸虫谷胱甘肽S-转移酶(rSj26 GST)的优化条件.方法 用含有Sj26基因的原核表达载体pGEX-3X转化大肠杆菌BL21(DE3),将影响可溶性rSj26 GST表达的4个因素,即温度、诱导剂IPTG浓度、诱导时细菌的密度和诱导时间进行正交设计,确定其优化表达条件并大量表达,采用谷胱甘肽亲和层析法纯化表达的蛋白,测定酶活性,通过Western blot鉴定免疫活性.结果 正交设计的直观分析和方差分析结果显示:可溶性rSj26 GST最佳表达条件为温度25 ℃,IPTG的浓度1 mmol/L,诱导前细菌的生长密度0.9,诱导表达时间8 h.可溶性rSj26 GST纯化的产量为16 mg/L,Western blot证实rSj26 GST具有良好免疫原性和免疫反应性.结论 通过正交设计确定了可溶性rSj26 GST在大肠杆菌中表达的优化条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李雍龙	华中科技大学同济医学院寄生虫学教研室	55	278	8.0	13.0
2	余光清	华中科技大学同济医学院寄生虫学教研室	3	52	3.0	3.0
3	蒋诗琴		1	13	1.0	1.0