日本血吸虫重组质粒pET28α-Sj26GST的构建及其表达

• 作者: 吴成果 李文桂 罗兴建 肖邦忠 陈雅棠
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 重组质粒pET28a-Sj26GST 大肠埃希菌 表达
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 760-763,770
• 分类号: R378|R392.2
• 语种: 中文

摘要

目的 构建日本血吸虫重组质粒pET28a-Sj26GST,研究该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达.方法 超声粉碎日本血吸虫成虫,提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得Sj26GST抗原编码基因,克隆至原核表达载体pET28a,构建重组质粒pET28a-Sj26GST,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析和鉴定.结果 RT-PCR扩增出676 bp的Sj26GST基因;双酶切和PCR鉴定证实Sj26GST基因成功插入pET28a中,SDS-PAGE分析显示表达产物为相对分子质量约为36×103的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的26%;Western blot鉴定重组蛋白能被日本血吸虫感染的兔血清识别.结论 成功构建了日本血吸虫重组质粒pET28d-Sj26GST,该质粒在大肠埃希菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李文桂	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	313	1230	16.0	20.0
2	吴成果		120	699	14.0	18.0
3	肖邦忠		132	909	16.0	21.0
4	罗兴建		107	528	11.0	14.0
5	陈雅棠	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	190	1020	16.0	23.0