日本血吸虫重组质粒pGEX-Sj14-3-3的构建及其在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达

• 作者: 张宁 李文桂 王敏 蔡世飞
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 重组质粒pGEX-Sj14-3-3 构建 大肠埃希菌 表达
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 310-313
• 分类号: R383.2
• 语种: 中文

摘要

目的 构建并研究日本血吸虫重组质粒pGEX-Sj14-3-3在大肠埃希菌BL21 (DE3)中的表达.方法 从日本血吸虫成虫组织提取总RNA;RT-PCR扩增Sj14-3-3编码基因；将此基因克隆至载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-Sj14-3-3；转化人DE3中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达；表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.结果 RT-PCR扩增出399 bp的Sj14-3-3编码基因；并成功将其插入pGEX-1λT构建了重组质粒pGEX-Sj14-3-3；SDP-PAGE显示相对分子质量约为40 000的重组蛋白,与预期结果相符,薄层扫描分析显示表达蛋白约占菌体总蛋白的21％;Western blot显示重组蛋白可被日本血吸虫感染兔血清识别.结论 日本血吸虫重组质粒pGEX-Sj14-3-3构建成功,重组质粒在大肠埃希菌BL21中可较高效表达,且表达蛋白具有特异的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李文桂	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	313	1230	16.0	20.0
2	王敏	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	38	116	6.0	9.0
3	蔡世飞	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	18	21	2.0	4.0
4	张宁	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	6	36	3.0	6.0