多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗的构建及其表达效率

• 作者: 朱佑明 李文桂 杨梅
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 多房棘球绦虫 重组Bb-Em14-3-3疫苗 构建 表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 148-151,159
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3
• 语种: 中文

摘要

目的 构建多房棘球绦虫(Em)重组双歧杆菌(Bb)-Em14-3-3疫苗,并研究Em14-3-3分子在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达效率.方法 通过PCR扩增Eml4-3-3抗原编码基因;将该基因定向克隆于含有谷胱甘肽一S转移酶(GST)基因的大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-IXT,构建重组质粒pGEX-Em14-3-3,用电穿孔法将该质粒导人Bb,构建多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗.经PCR和酶切鉴定后以IPTG诱导表达Em14-3-3/GST融合蛋白;SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定.结果 PCR成功扩增出530 bp的Em14-3-3基因;双酶切证实Em14-3-3基因插入pGEX-1λT中,PCR证实重组Bb-Em14-3-3疫苗构建成功;SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒转化宿主菌在IPTG诱导下高效表达了Em14-3-3/GST融合蛋白,表达效率为23%.瞎论成功构建了多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗,重组质粒pGEX-Em14-3-3在大肠杆菌中获得了高效表达,Western blot结果提示表达出的Em14-3-3重组蛋白具有特异抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李文桂	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	313	1230	16.0	20.0
2	朱佑明	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	47	304	10.0	14.0
3	杨梅	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	55	248	8.0	12.0