四川株多房棘球绦虫elp基因融合表达载体的构建及其诱导表达

• 作者: 余登高 唐霓 王昌源 陈雅棠 黄爱龙
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多房棘球绦虫 elp基因 ELP抗原 克隆 融合蛋白 免疫诊断
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 37-41
• 页数: 5页
• 分类号: R511
• 字数: 3732字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2003.04.012

摘要

目的实现多房棘球绦虫elp基因在原核中的表达,为进一步研究多房棘球绦虫ELP抗原的诊断及免疫保护性提供前提条件.方法应用RT-PCR方法从中国四川株多房棘球绦虫续绦期幼虫RNA获得elp基因编码序列,克隆测序后亚克隆于含有硫氧环蛋白(Trx)基因的高效原核表达载体pET32a(+).经酶切鉴定后以IPTG诱导表达ELP/Trx融合蛋白.SDS-PAGE及Western blot进行鉴定.亲和层析纯化ELP/Trx融合蛋白,用于ELISA检测患者血清特异性抗体.结果酶切鉴定显示本研究已将elp基因编码序列插入pET32a(+)的多克隆位点,成功地构建了pETrx-ELP融合蛋白原核表达载体.SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒转化宿主菌在IPTG诱导下高效表达了ELP/Trx融合蛋白.检测10份包虫病人血清均阳性,10份肝吸虫病、10份乙肝病人和10份健康人血清均为阴性.结论中国四川株多房棘球绦虫elp基因在大肠杆菌中获得了高效融合表达,初步实验结果显示该融合蛋白对包虫病具有诊断价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余登高	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	31	274	10.0	15.0
2	唐霓	重庆医科大学病毒性肝炎研究所	59	385	10.0	17.0
3	黄爱龙	重庆医科大学病毒性肝炎研究所	236	1190	16.0	23.0
4	陈雅棠	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	190	1020	16.0	23.0
5	王昌源	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	8	77	5.0	8.0