枯草杆菌ylyA基因表达载体的构建及诱导表达

• 作者: 霍乃蕊
• 来源期刊: 山西农业大学学报(自然科学版)
• 关键词: 枯草杆菌 ylyA 表达载体 诱导表达
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 页码范围: 294-297
• 页数: 4页
• 分类号: Q933
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8151.2009.04.002

摘要

ylyA是枯草杆菌的一种功能未知基因,本研究旨在建立YlyA的诱导表达体系,为其结构分析和功能研究奠定基础.PCR扩增ylyA序列,将其克隆到pETMCSIII中构建表达载体pNG252,测序分析无突变后用IPTG诱导6×His-YlyA融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达产物进行分析.实验结果表明:pNG252中ylyA插入方向正确,序列无突变; 新鲜的转化子培养至OD600为0.7左右时,用0.000 5 mol·L-1 IPTG ,37 ℃诱导3 h,YlyA高效表达.因此本研究成功构建了YlyA高效可诱导表达载体并建立了YlyA蛋白的诱导表达条件,所得到的6×His-YlyA融合蛋白,纯化后可用于YlyA晶体结构分析和功能研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	霍乃蕊	山西农业大学食品科学与工程学院	86	578	12.0	21.0