细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗构建及鉴定

• 作者: 周必英 李文桂 杨梅 陈雅棠
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细粒棘球绦虫 重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗 构建 鉴定
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 502-506
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3
• 字数: 4586字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.06.002

摘要

目的 构建和鉴定细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31融合基因疫苗.方法 自行设计引物,从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR分别扩增Eg95和EgA31抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Eg95和EgA31,得到Eg95-EgA31融合基因,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切,定向克隆到大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,构建重组质粒pGEX-Eg95-EgA31,抽提质粒进行双酶切鉴定,电穿孔法转化两歧双歧杆菌(Bifidobacteria bifidum,Bb),构建细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定.结果 RT-PCR扩增出约1 016bp的Eg95-EgA31融合基因;重组质粒用双酶切鉴定可切出预期大小片段,以具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提的质粒为模板进行PCR扩增可得到约1 016bp的Eg95-EgA31融合基因片段.结论 成功构建了细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗,为该疫苗的开发利用奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李文桂	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	313	1230	16.0	20.0
2	周必英	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	24	102	6.0	9.0
4	陈雅棠	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	190	1020	16.0	23.0
5	杨梅	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	55	248	8.0	12.0