表达细粒棘球蚴EG95蛋白重组狂犬病病毒的构建、鉴定与免疫研究

• 作者: 刘乐乐 杨松涛 燕丽娜 田莉 许彤 赵忠欣 郑学星 郑文文
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 细粒棘球蚴 狂犬病病毒 EG95蛋白 反向遗传 二联疫苗
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 379-384
• 页数: 6页
• 分类号: R373.9|R383.33
• 字数: 5661字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2020.05.012

摘要

目的 研制一种可同时预防棘球蚴病与狂犬病的重组活载体疫苗.方法 利用反向遗传技术,将细粒棘球蚴Eg95基因ORF区插入狂犬病病毒弱毒SAD株基因组的假基因区,得到全长感染性克隆,与辅助质粒共转染BHK-21细胞,拯救获得重组狂犬病病毒SAD-EG95株.结果 重组病毒SAD-EG95株经RT-PCR与免疫荧光鉴定,表明重组病毒基因组中包含细粒棘球蚴Eg95基因,且能表达EG95蛋白.该重组病毒能在BHK-21和NA细胞中复制,病毒生长曲线与亲本株SAD差异较小,且传代稳定性良好,能在小鼠模型中诱导产生狂犬病病毒和细粒棘球蚴特异性保护抗体.结论 成功构建表达细粒棘球蚴EG95蛋白的重组狂犬病病毒,为进一步研制预防狂犬病和细粒棘球蚴的二联疫苗奠定了基础.