细粒棘球蚴eg95基因的克隆以及原核融合表达

• 作者: 李轶女 沈桂芳 贾如 邹媛媛 魏兆军
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 细粒棘球蚴 原核表达 酶联接免疫吸附剂测定
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 171-175
• 页数: 5页
• 分类号: Q3
• 字数: 3176字
• 语种: 中文

摘要

从青海省羊源细粒棘球蚴提取基因组DNA,PCR扩增eggs基因并且克隆.测序结果表明该基因序列全长1 262bp,由2个内含子和3个外显子组成,3个外显子分别为70bp、306bp和95bp.因此,推测其ORF为471bp,编码156个氨基酸.用RT-PCR方法扩增该基因的ORF,经克隆、DNAstar比对分析序列,它与预测的ORF序列100%相同.将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-5x-1,构建重组表达质粒pGEX-5x-1-eg95,将其转入表达菌株BL21中进行原核表达.表达产物经过SDS-PAGE电泳分析,得到一条特异的蛋白条带;质谱鉴定证明表达的蛋白确实是eg95抗原蛋白;酶联接免疫吸附剂测定表明抗原抗体发生了特异性反应,进一步证明融合蛋白进行了正确表达,从而为囊型包虫病的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈桂芳	中国农业科学院生物技术研究所	49	807	17.0	26.0
2	魏兆军	合肥工业大学生物与食品工程学院	79	759	16.0	22.0
3	贾如	合肥工业大学生物与食品工程学院	2	4	2.0	2.0
4	李轶女	中国农业科学院生物技术研究所	52	364	10.0	17.0
5	邹媛媛	中国农业科学院生物技术研究所	4	10	2.0	3.0