细粒棘球绦虫重组CTxB-Eg95(TP)融合蛋白的原核表达

• 作者: 张玉宝 王亚军 王志力 谢忠奎 郭志鸿
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: Eg95(TP)基因序列 霍乱毒素B亚单位 融合基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 360-364
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3
• 字数: 4347字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.04.019

摘要

目的 构建CTxB-Eg95(TP)融合基因原核表达载体,并诱导表达CTxB-Eg95(TP)融合蛋白.方法 采用PCR技术分别克隆CTxB基因和141bp的Eg95基因片段序列Eg95(TP)并鉴定.分别将两个基因片段定向克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,构建pET-CTxB-Eg95(TP)重组质粒.将鉴定为阳性的重组质粒转化E.Coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳鉴定.结果 测序结果表明已成功构建CTxB-Eg95(TP) 融合基因的原核表达载体,SDS-PAGE电泳结果显示,转染pET-CTxB-Eg95(TP)的E.Coli BL21(DE3)菌经IPTG诱导可表达大小约23.5kDa的特异蛋白条带,与预期结果一致.结论 CTxB-Eg95(TP) 融合基因获得了高水平的表达,为Eg95的表位研究和应用于口服疫苗奠定了基础.