日本血吸虫(中国大陆株)14-3-3信号转导蛋白epsilon亚型基因[Parasitol1]真核表达重组质粒的构建及序列分析

• 作者: 唐小牛 汪学龙 沈继龙 陈文魁
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 14-3-3蛋白 epsilon亚型 基因测序
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 220-222,227
• 页数: 4页
• 分类号: R383.2
• 字数: 3677字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.03.015

摘要

目的构建日本血吸虫中国大陆株14-3-3信号转导蛋白epsilon亚型基因真核表达重组质粒pBK-Sj14-3-3,为进一步对重组蛋白的融合表达及保护性免疫的研究提供条件.方法根据日本血吸虫14-3-3蛋白的核苷酸序列,设计合成一对引物,以日本血吸虫中国大陆株成虫总RNA为模板,用RT-PCR法合成日本血吸虫中国大陆株14-3-3蛋白epsilon亚型基因cDNA片段.将其克隆入pGEM-T载体,经双酶切及PCR鉴定后,再亚克隆入pBK-CMV真核表达质粒,构建重组质粒pBK-Sj14-3-3,转化到大肠杆菌BL21感受态细胞,提取重组质粒双酶切鉴定并进行序列分析.结果 RT-PCR产物、 pGEM-T-Sj14-3-3及pBK-Sj14-3-3分别经双酶切均获得一特异性基因片段.经测序分析后该片段具有一个753bp完整开放阅读框(open reading frame,ORF),由此推导的氨基酸序列具有多种蛋白激酶的磷酸化位点.结论成功地构建了日本血吸虫中国大陆株14-3-3信号蛋白epsilon亚型基因真核表达重组质粒,并对其核苷酸序列及推导的氨基酸序列蛋白激酶磷酸化位点进行分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈继龙	安徽医科大学病原生物学教研室	153	854	13.0	17.0
2	汪学龙	安徽医科大学病原生物学教研室	113	471	11.0	16.0
3	陈文魁	皖南医学院寄生虫学教研室	21	37	3.0	5.0
4	唐小牛	皖南医学院寄生虫学教研室	54	129	7.0	9.0