高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒NASBA-ELISA

• 作者: 吴华伟 梁海霞 薛青红 邓永 郎洪武 陈晓春 高金源
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒 核酸序列依赖性扩增 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 401-404
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3137字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.05.005

摘要

针对猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF1中编码Nsp2的基因序列设计引物,建立了核酸序列依赖性扩增(NASBA)方法,并结合微孔板中波相杂交和酶标显色反应检测NASBA扩增产物,建立了检测高致病性PRRSV的NASBA-ELISA.琼脂糖凝胶电泳显示,NASBA方法扩增出了特异性的目的条带.将NASBA产物RNA系列稀释后同时进行了ELISA和Northern杂交.结果显示,ELISA和Northern杂交最高可分别检测到1:50和1:30稀释的产物RNA.采用建立的NASBA-ELISA可检测到101.83 TCID50/mL的HuN4株PRRSV.该方法只对3株高致病性PRRSV的检测结果为阳性,对经典株PRRSV和其他猪源病毒的检测结果均为阴性.结果表明,NASBA-ELISA能够敏感并特异地检测高致病性PRRSV.