流式细胞术检测肿瘤耐药细胞中P-糖蛋白细胞前处理方法的优化

• 作者: 汪明 肖玉秀 陈家宽
• 来源期刊: 武汉大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 流式细胞术 P-糖蛋白 肿瘤耐药细胞 细胞处理方法
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法学研究
• 页码范围: 195-199,204
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文

摘要

目的:优化流式细胞术(FCM)检测肿瘤耐药细胞中P-糖蛋白(P-gP)的细胞前处理方法,提高细胞中P-gP的检出率.方法:采用抗原决定簇在细胞膜内的单抗JSB-1,以阳性百分比为优化指标,耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/A为模型细胞,对FACSTM透化溶液的有无、FACSTM透化溶液的浓度、FACSTM透化溶液处理细胞的时间、鼠抗JSB-1抗体的孵育时间、羊抗鼠IgG-FITC(GAMIF)抗体的孵育时间、JSB-1抗体工作液的保存条件、以及细胞数量进行优化.结果:上述细胞处理方法对MCF-7/A的阳性百分比均有不同程度的影响;相对最佳的细胞处理方法为:5×10 5-20×10 5个细胞用FACSTM透化溶液的6倍稀释液处理10 min,37℃下与JSB-1抗体孵育75min、与GAMIF抗体孵育30 min,JSB-1抗体工作液于4℃保存或新鲜配制.结论:对FCM检测前的细胞处理方法进行优化,能显著提高肿瘤耐药细胞中P-gp的检出率,因而更能真实、客观地反映肿瘤耐药细胞的P-gP表达水平及耐药程度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈家宽	武汉大学药学院	28	344	9.0	18.0
2	汪明	武汉大学人民医院检验科	58	269	9.0	12.0
3	肖玉秀	武汉大学药学院	29	232	8.0	14.0