CXCR4基因修饰骨髓间充质干细胞体外迁移实验

• 作者: 孔德领 张悦 欧来良 程兆康 贾小花 高年发
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 间充质干细胞 基质细胞衍生因子受体 基质细胞衍生因子-1 迁移
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 595-600
• 页数: 6页
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文

摘要

构建一种高表达基质细胞衍生因子受体(CXCR4)的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),考察CXCR4对细胞定向迁移能力的影响.实验构建了pMSCV-CXCR4-IRES-GFP基因质粒,并通过逆转录病毒将其转入预先培养的MSCs中.分别采用流式细胞分析仪、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光染色法检测CXCR4在MSCs中的表达,并利用Transwell方法检测基质细胞衍生因子(SDF-1)对MSCs体外定向迁移的影响.流式细胞仪分析显示,转基因MSCs表面CXCR4的阳性率为46%,绿色荧光蛋白(GFP)阳性率为57%.RT-PCR进一步证实了CXCR4的表达.细胞迁移实验结果表明, CXCR4基因修饰促进了MSCs向SDF-1的定向迁移,当SDF-1浓度为50 ng/ml时,这种定向迁移能力较之对照组提高了近5倍.通过以上结果可以初步证实,MSCs表面CXCR4表达量在SDF-1/CXCR4介导的细胞迁移通路中发挥着重要作用,这为进一步研究MSCs的体内迁移和归巢提供了依据.