多重PCR方法快速检测猪的5种呼吸道病原菌

• 作者: 何启盖 李文洁 熊金凤 薛云 赵战勤 邹浩勇 陈杨 陈焕春
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 呼吸道病原 多重PCR 检测
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1222-1228
• 页数: 7页
• 分类号: S858.285.1|S8526.1
• 字数: 5566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.08.015

摘要

猪胸膜肺炎放线杆菌(App)、副猪嗜血杆菌(Hps)、支气管败血波氏杆菌(Bb)、产毒性多杀巴氏杆菌(T+Pm)和猪肺炎支原体(Mhp)是最常见的几种猪呼吸道病原菌.笔者参照文献报道的基因序列设计针对App、Hps、Bb、T+Pm和Mhp的特异性引物,对单一PCR条件进行系统优化后建立5重PCR方法.该多重PCR方法能对同一样品中5种病原菌的DNA模板进行扩增,且在5种病原菌之间没有交叉反应;对大肠杆菌等其它6种常见猪细菌性病原的榆测结果均为阴性;对5种病原菌DNA模板检出的最小最均低于160 Pg,且能从攻毒小鼠(App、Hps、Bb和T+Pm)肺脏组织8 h增菌的培养物中快速检测出相应的病原菌.对中国华中地区269份临床样本的检测结果表明,5种呼吸道病原菌在华中地区猪群中普遍存在,且混合感染情况十分严重.这些试验结果表明该多重PCR方法可用于猪呼吸道病原菌App、Hps、Bb、T+Pm和Mhp的单一或混合感染的鉴别诊断及病原流行病学调查.