两种2-细胞鼠胚体外培养方法比较

• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠 胚胎发育 体外
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 67-69,插8
• 页数: 4页
• 分类号: R971
• 字数: 2260字
• 语种: 中文

摘要

目的 应用鼠胚质控中的小鼠胚胎体外培养模型,探讨两种胚胎培养方式(四孔皿与微滴法)在单胚观察时间上的差异以及对2-细胞鼠胚体外发育潜能的影响.方法 取6～8周龄的昆明白雌性小鼠.采用HMG 10IU促排卵,48 h后注射HCG 10IU促卵泡成熟,取形态正常的2-细胞鼠胚.每5～10个胚胎培养在含500 μL培养基的四孔皿中(A组),或单个胚胎接种在含50 μL的培养微滴中(B组).培养后,每隔24 h在倒置显微镜下观察一次,计算单胚观察时间,并检测24 h时的≥4细胞胚形成率、48 h的融合胚形成率、72 h的囊胚与扩张囊胚形成率、96 h囊胚孵化率.结果 两种培养方式于同一试验条件下分别试验5次,A组培养83个胚胎,B组培养69个2-细胞鼠胚.在每一个观察点上,微滴培养的单胚观察时间远超过四孔皿培养(P＜0.001).但两组各时间点的胚胎发育率相似,无显著差异(P＞0.05).结论 尽管微滴单胚培养方式的胚胎暴露培养箱外时间长,但与四孔皿多胚培养方式比较,两者间2-细胞鼠胚的体外发育潜能相似.