甘露糖正向筛选体系的建立及在拟南芥遗传转化中的应用

• 作者: 夏新莉 尹伟伦 杨彩云
• 来源期刊: 分子植物育种
• 学科: 生物学
• 关键词: 磷酸甘露糖异构酶(PMI)基因 甘露糖 AmCBL1 遗传转化 拟南芥
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1120-1129
• 页数: 10页
• 分类号: Q94
• 字数: 8596字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/mpb.007.001120

摘要

为了研究甘露糖正向筛选体系在拟南芥转化中的有效性,本研究参照GenBank上公布的PMI基因序列,通过PCR从大肠杆菌克隆了6-磷酸甘露糖异构酶(6-phosphomannose isomerase,PMI)基因,替换植物表达载体pCAMBIA1301中的潮霉素磷酸转移酶(hygromycin phosphotransferase,HPT)基因,并将以CaMV 35S和AmCBLIP两种启动子调摔的沙冬青AmCBL1基因成功地构建到重组载体pPMI上,并导入根癌农杆菌EHA105中,然后通过农杆菌花序浸染法转入拟南芥.将获得的阳性植株通过GUS组织化学法鉴定、氯酚红(chlorophenol red,CPR)法及PCR检测,证明PMI基因已经转入拟南芥中.在不使用抗生素和除草剂的情况下这种筛选体系为转基因拟南芥筛选提供了更加安全有效的方法,并且为以后AmCBL1基因的功能验证及植物抗逆性的改良奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹伟伦	北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室	165	3260	31.0	50.0
2	夏新莉	北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室	77	1233	20.0	32.0
3	杨彩云	北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室	1	15	1.0	1.0