mHCN2基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞用于构建生物起搏器的基础研究

• 作者: 全小庆 张存泰 林立 王国强 马金
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 起搏电流 基因治疗
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 291-295
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2009.03.003

摘要

目的 构建起搏基因质粒pIRES2-EGFP-mHCN2并转染到大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),检测其在MSCs中核酸和蛋白水平是否表达.方法 采用密度梯度离心法分离获得MSCs.EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切质粒pGH-mH-CN2和pIRES2-EGFP,回收目的 片段,T4DNA连接酶连接.转化筛选阳性菌落,酶切和测序鉴定mHCN2是否插入pIRES2-EGFP中.脂质体转染质粒pIRES2-EGFP-mHCN2至MSCs,荧光显微镜下鉴定,并采用RT-PCR方法和Western blot方法分别检测转染质粒pIRES2-EGFP-mHCN2对mHCN2 mRNA和蛋白表达的影响.结果 酶切鉴定和测序结果均证明mHCN2片段插入质粒plRES2一EGFP.荧光显微镜下可见转染了质粒的MSCs发出绿色荧光.已转染质粒MSCs的mHCN2 mRNA的平均相对表达量是未转染MSCs的5.31倍(P<0.05),mHCN2蛋白是未转染MSCs的7.55倍(P<0.05).结论 成功构建质粒pIRES2-EGFP-mHCN2,证明了目的 基因mHCN2在MSCs中mR-NA和蛋白均有表达,为进一步研究生物起搏器奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马金	华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科	5	32	2.0	5.0
2	张存泰	华中科技大学同济医学院附属同济医院综合科	164	788	13.0	19.0
3	全小庆	华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科	23	48	4.0	5.0
4	林立	华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科	22	80	6.0	8.0
5	王国强	华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科	8	124	4.0	8.0