绿色荧光蛋白转基因大鼠骨髓间充质干细胞培养及鉴定

• 作者: 刘元果 刘慧娟 戴王娟 胡若愚 蒋犁 闵波
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 绿色荧光蛋白 诱导分化
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 9-15
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2016.01.002

摘要

目的 体外分离、培养和鉴定增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转基因大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs).方法 取EGFP转基因大鼠胫、股骨骨髓,全骨髓贴壁法分离培养、纯化BMSCs;荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪分析细胞表型;CCK-8法绘制细胞生长曲线并与野生型BMSCs增殖情况相比较;分别向成脂、成骨、成软骨诱导分化鉴定;将细胞经鼠尾静脉移植入大鼠体内,观察其在体内定植情况.结果 获得稳定表达EGFP的BMSCs,以长梭形为主,融合后呈漩涡状排列;生长曲线示EGFP-BMSCs增殖能力旺盛,与野生型BMSCs相比差异无统计学意义(t=-0.023,P=0.982);细胞CD29、CD90、CD34、CD49d、CD45表达率分别为99.4％、96.4％、0.171％、0.049％、0.038％;成脂、成骨、成软骨诱导后,分别给予油红O、茜素红、甲苯胺蓝染色,结果均呈阳性;在肺组织内可检测到稳定的绿色荧光.结论 成功获得高纯度、稳定表达EGFP的BMSCs,干细胞特性不受EGFP影响.细胞定植后,示踪效果良好,可用于后续实验研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋犁	东南大学附属中大医院儿科	113	683	14.0	18.0
2	刘慧娟	东南大学附属中大医院儿科	4	24	2.0	4.0
3	戴王娟	东南大学附属中大医院儿科	5	28	3.0	5.0
4	胡若愚	东南大学附属中大医院心胸外科	7	21	1.0	4.0
5	刘元果	东南大学附属中大医院心胸外科	2	20	1.0	2.0
6	闵波	东南大学附属中大医院心胸外科	2	20	1.0	2.0