慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白筛选稳定转染的兔骨髓间充质干细胞

• 作者: 周劲松 张蕊 李琦 杨瑞泽 邓洪利 邹志余
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 慢病毒载体 增强型绿色荧光蛋白 转染 嘌呤霉素
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 技术方法研究
• 页码范围: 619-623
• 页数: 5页
• 分类号: R393
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201904025

摘要

目的 分离、培养并鉴定兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),探讨慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)感染兔BMSCs的最佳条件,筛选稳定转染的兔BMSCs.方法 通过全骨髓贴壁法获得兔BMSCs;茜素红、甲苯胺蓝及油红O染色对BMSCs成骨、成软骨及成脂分化进行鉴定;免疫荧光组化染色检测CD44及CD90的表达;不同浓度嘌呤霉素筛选BMSCs的最小致死浓度;以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为50、100、150、200的慢病毒载体介导eGFP转染BMSCs,倒置显微镜下观察荧光表达,并用嘌呤霉素筛出稳定转染系.结果 当MOI为1 50,慢病毒载体介导eGFP感染兔BMSCs效率最高;嘌呤霉素筛选稳定转染兔BMSCs的最适质量浓度是1.0μg/mL.结论 成功培养了兔BMSCs,用慢病毒介导的GFP标记了兔BMSCs并筛选出了稳定转染的兔BMSCs,建立了一个简便有效的干细胞标记方法,为BMSCs在动物体内实验标记示踪奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张蕊		22	127	5.0	11.0
2	李琦		17	60	5.0	7.0
6	周劲松		20	95	6.0	9.0
7	邹志余		3	2	1.0	1.0
11	杨瑞泽		2	3	1.0	1.0
12	邓洪利		1	2	1.0	1.0