电转染技术促进人胚肺二倍体成纤维细胞的衰老进程

• 作者: 娄小燕 孙爱军 王克强 葛均波 邹云增
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: 电转染 衰老 P16
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 新技术和新方法
• 页码范围: 308-311
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 语种: 中文

摘要

目的 观察NucleofectorTM电转染技术对人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5)衰老进程的影响.方法 取年轻代数的MRC-5细胞(30代),分为3组,第1组为正常培养对照组,第2组为未加质粒电转对照组,第3组为空质粒EGFP-N1电转组.采用NucleofectorTM电转仪配合试剂盒用U-023程序进行电转,计算细胞衰老相关SA-β-半乳糖苷酶(gal)阳性率,分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法分别测定p16 mRNA、P16蛋白的表达.结果 ①第1组的SA-β-gal阳性率为(9.01±0.65)%,显著低于第2组的(32.00±0.31)%和第3组的(31.13±1.62)%(P值均<0.01),后两组间的差异无统计学意义(P0.05).②第2组、第3组的p16 mRNA、P16蛋白均显著高于第1组(P值均<0.05),第2组与第3组间的差异无统计学意义(P值均0.05).结论 NucleofectorTM电转方法 可促进人MRC-5的衰老,此作用可能是通过上调P16蛋白的表达来实现的.