慢病毒载体介导端粒酶逆转录酶小干扰RNA治疗肝癌的实验研究

• 作者: 孙倍成 席力森 张勇 殷爱红 王学浩 邓蕾 高云
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞癌 端粒酶逆转录酶 RNA干扰 慢病毒
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 410-413
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2564字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2009.06.003

摘要

目的 探讨慢病毒介导的端粒酶逆转录酶(hTERT)小干扰RNA(siRNA)对肝癌细胞生长的影响.方法 构建携带hTERT siRNA的慢病毒表达载体,在体外转染人肝癌HepG2细胞系,以MTT法测定细胞生长变化,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA的表达.将转染hTERT siRNA的HepG2细胞,接种于裸鼠腋窝皮下,观察移植瘤生长情况.取移植瘤组织,常规HE染色,行组织学观察,应用原位末端标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡情况.结果 hTERT siRNA转染HepG2细胞后,随着时间的延长,对细胞增殖的抑制作用逐渐增强,到第8天,干扰组细胞抑制率为57.5%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).RT-PCR产物凝胶电泳图显示,hTERT siRNA转染后,肿瘤细胞的端粒酶活性明显下降.转染后72 h,干扰组hTERT mRNA的表达水平为0.035±0.007,明显低于空载体对照组(0.151±0.016)和空白对照组(0.155±0.014,均P<0.01).转染细胞皮下接种后,干扰组的肿瘤生长速度明显慢于两个对照组,随着时间的延长,差异越来越明显.移植瘤组织常规HE染色显示,组织坏死增多,周围炎性细胞浸润.TUNEL检测结果显示,细胞凋亡增多,增殖减慢.结论 慢病毒介导的hTERT siRNA转染能明显抑制肝癌细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高云	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	13	33	4.0	5.0
2	孙倍成	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	36	192	7.0	12.0
3	王学浩	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	205	907	13.0	17.0
4	张勇	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	53	388	11.0	17.0
5	邓蕾	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	4	8	2.0	2.0
6	殷爱红	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	3	3	1.0	1.0
7	席力森	南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心	3	6	1.0	2.0