天祝白牦牛LF基因克隆及分子特征

• 作者: 冯瑞林 包鹏甲 厍睿 姬国红 曾玉峰 朱新书 梁春年 裴杰 郭宪 阎萍
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牦牛 LF基因 克隆 分子特征
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 1030-1038
• 页数: 9页
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.03.035

摘要

[目的]哺乳动物乳铁蛋白(Laetoferrin,LF)在抗菌、抗病毒、抗肿瘤、调节免疫等方面起着重要作用.本试验对天祝白牦牛乳铁蛋白基因的编码区进行克隆和分子特征分析. [方法]以处于干乳期的天祝白牦牛乳腺组织为材料,通过RT-PCR克隆了包含LF基因编码区的cDNA序列(GenBank收录号为EU547252);将克隆获得的天祝白牦牛LF基因的cDNA与奶牛相应序列进行比对;对天祝白牦牛LF蛋白(GenBank收录号为ACB29795)与其它物种LF蛋白进行序列比对和进化树分析;对牦牛LF蛋白的特性和结构进行预测. [结果]克隆获得天祝白牦牛LF基因cDNA片段长度为2 344 bp,其中z,基因编码区全长2 124 bp,编码708个氨基酸;序列分析显示,克隆获得的牦牛cDNA序列与奶牛该序列存在15个碱基的变异,其中位于LF,基因编码区的变异有12个,这些突变造成4个氨基酸变异;天祝白牦牛LF蛋白与奶牛、人、小鼠、山羊、绵羊、猪、狗、马、骆驼、猩猩、鸡LF蛋白氨基酸相似度分别为99.4%、69.5%,63.5%、92.4%、91.5%、72.9%、69.1%,72.6%、75.3%、69.5%和50.9%;各物种LF蛋白进化树符合物种进化规律;同源建模预测LF 3D模型显示,LF为多肽链在二级结构基础上折叠形成2个极相似的、对称的球状叶,即N叶和C叶,中间由1段对蛋白酶敏感的α-螺旋连接,呈"二枚银杏叶型"结构.[结论]从天祝白牦牛克隆获得LF,基因编码区全长序列并揭示了其分子特征,为牦牛LF蛋白基因工程和蛋白质功能的研究奠定了基础.