牦牛乳酸脱氢酶-1两种遗传变异体的纯化及酶学特性比较

• 作者: 吴常信 周静 朴影 李宁 洪键 贺庆华 赵兴波 郑玉才 金素钰
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牦牛 乳酸脱氢酶 遗传变异体 低氧耐受 分子适应性
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 1047-1052
• 页数: 6页
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.03.037

摘要

[目的]从乳酸脱氢酶(LDH)水平上探索牦牛(Bos grunniens)低氧适应性分子机制.[方法]利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析牦牛组织中LDH同工酶谱;用比色法测定牦牛、黄牛和水牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力;采用染料亲和层析和DEAE-Sephadex离子交换层析从牦牛心肌组织中纯化LDHI(由4个H亚基组成)的2种遗传变异体,进行酶学性质的比较.[结果]电泳方法检测发现牦牛LDH1存在2种遗传变异体,根据电泳迁移率分别命名为快型和慢型(LDH1-F和LDH1-S).获得纯化的牦牛LDH1-F和LDH1-S,比活力分别为21.4 U·mg-1蛋白和17.8 U-mg-1蛋白,在SDS-PAGE和PAGE上均显示1条区带.2种变异体以NADH为底物的米氏常数(Ka)值差异不大,均显著高于普通牛的LDH1;以丙酮酸钠为底物的Ka值LDHI-F小于LDHI-S.试验进一步比较了携带不同LDH1变异体的牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力和各种同工酶谱,未见显著差异,而牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力显著或极显著低于黄牛和水牛.[结论]牦牛LDH1 2种遗传变异体的Ka值存在差异,且Ka(HADH)高于普通牛;牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力低于普通牛.