应用McMSP分析Rassfla启动子区域甲基化

• 作者: 谭俊青 钮心怡
• 来源期刊: 国际医药卫生导报
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量PCR 熔解曲线分析 DNA甲基化 SYBR.Green.I
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 临床检验
• 页码范围: 81-83
• 页数: 3页
• 分类号: R4
• 字数: 2533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-1245.2009.06.034

摘要

目的 应用McMSP分析抑癌基冈Rassfla启动子区域甲基化,同时比较MSP与McMSP之间的异同.方法 (1)对常规甲基特异性PCR(MSP)扩增后的产物进行熔解曲线分析(MCA);(2)将SYBR Green I直接加入PCR反应前体系进行扩增;(3)探索McMSP分析的灵敏度,将标本按1:10、1:100、1:500、1:1 000、1:5 000、1:10 000稀释后,分别行MSP和MeMSP.结果 (1)不应用商业试剂盒同时将SYBR Green I浓度降低,仍能获得较好结果;(2)Q-PCR MCA能将完全甲基化和完全未甲基化DNA标本区分;(3)在将DNA标本1:10 000稀释后(DNA量＜2pg)仍可以检测到所需要的目的产物,而常规MSP在1:100稀释(DNA量＞100pg)时就已不能检测到产物;(4)McMSP区分正常癌旁组织和癌组织的能力较常规MSP大大增强.结论 利用Q-PCR MCA分析Rassfla启动子区域甲基化迅速准确,操作简便,结果以曲线形式给出,具有较常规MSP更高的灵敏度和区分能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钮心怡	广东省第二中医院检验科	18	239	8.0	15.0
2	谭俊青	广东省第二中医院检验科	25	130	6.0	11.0