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摘要:
目的 应用McMSP分析抑癌基冈Rassfla启动子区域甲基化,同时比较MSP与McMSP之间的异同.方法 (1)对常规甲基特异性PCR(MSP)扩增后的产物进行熔解曲线分析(MCA);(2)将SYBR Green I直接加入PCR反应前体系进行扩增;(3)探索McMSP分析的灵敏度,将标本按1:10、1:100、1:500、1:1 000、1:5 000、1:10 000稀释后,分别行MSP和MeMSP.结果 (1)不应用商业试剂盒同时将SYBR Green I浓度降低,仍能获得较好结果;(2)Q-PCR MCA能将完全甲基化和完全未甲基化DNA标本区分;(3)在将DNA标本1:10 000稀释后(DNA量<2pg)仍可以检测到所需要的目的产物,而常规MSP在1:100稀释(DNA量>100pg)时就已不能检测到产物;(4)McMSP区分正常癌旁组织和癌组织的能力较常规MSP大大增强.结论 利用Q-PCR MCA分析Rassfla启动子区域甲基化迅速准确,操作简便,结果以曲线形式给出,具有较常规MSP更高的灵敏度和区分能力.
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文献信息
篇名 应用McMSP分析Rassfla启动子区域甲基化
来源期刊 国际医药卫生导报 学科 医学
关键词 实时荧光定量PCR 熔解曲线分析 DNA甲基化 SYBR.Green.I
年,卷(期) 2009,(6) 所属期刊栏目 临床检验
研究方向 页码范围 81-83
页数 3页 分类号 R4
字数 2533字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.1007-1245.2009.06.034
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 钮心怡 广东省第二中医院检验科 18 239 8.0 15.0
2 谭俊青 广东省第二中医院检验科 25 130 6.0 11.0
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研究主题发展历程
节点文献
实时荧光定量PCR
熔解曲线分析
DNA甲基化
SYBR.Green.I
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
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期刊影响力
国际医药卫生导报
半月刊
1007-1245
44-1417/R
大16开
广州市海珠区江南大道南1066号新城国际公寓4号楼209-210室
46-156
1995
chi
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