腺病毒介导bcl-2基因转染对顺铂所致大鼠螺旋神经节细胞损伤的拮抗作用

• 作者: 刘英鹏 王国鹏 罗凌惠 董继华 谢静 鲁海涛 龚树生
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒科 转染 螺旋神经节 基因 bcl-2 顺铂 大鼠 Sprague-Dawley
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 930-934
• 页数: 5页
• 分类号: R9
• 字数: 4134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2009.11.011

摘要

目的 通过腺病毒(adenovirus,Ad)载体介导bcl-2基因转染体外培养的新生大鼠耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion cells,SGC),探讨bel-2蛋白过度表达对顺铂所致SGC损伤的拮抗作用.方法 体外培养新生大鼠SGC,携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒载体Ad-GFP转染SGC,并行神经丝蛋白(NF200)免疫细胞化学染色鉴定,激光共聚焦扫描荧光显微镜下观察.携带bel-2基因的腺病毒载体Ad-bel-2转染SGC,蛋白质印迹法(Western Blot)检测bcl-2蛋白表达.设立Ad-bcl-2转染加顺铂组(A组),Ad-GFP转染加顺铂组(B组),顺铂组(C组)和正常对照组(D组),顺铂作用浓度为2μg,/ml;顺铂作用48 h后,行各组SGC计数,并通过lmageJ软件测量各组SGC轴突长度.结果 成功分离并培养新生大鼠SGC.激光共聚焦扫描荧光显微镜下观察到腺病毒载体可安全高效转染体外培养的SGC.Ad-bcl-2转染3 d后,Western Blot检测有外源性人bcl-2基因的高效表达,而Ad-GFP转染组和顺铂组未检测到表达.顺铂作用后,A、B、C组部分SGC细胞突起变短、萎缩,胞体缩小、变圆,甚至浮起.A组SGC数目明显多于B组和C组(P值均＜0.01),但少于D组(P＜0.05);A组SGC轴突长度明显长于B组和C组,但短于D组(P值均＜0.01).结论 腺病毒能够安全高效地转染体外培养的新生大鼠SGC.bel-2蛋白过表达对顺铂所致SGC损伤有一定的拮抗作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董继华	华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室	70	396	11.0	16.0
2	刘英鹏	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	19	60	5.0	6.0
3	王国鹏	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	10	53	4.0	7.0
4	罗凌惠	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	24	115	6.0	9.0
5	龚树生	首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科	164	584	11.0	16.0
6	谢静	首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科	46	196	8.0	11.0
7	鲁海涛	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	19	88	5.0	9.0