重组腺病毒构建及转染培养耳蜗Corti器和螺旋神经节细胞的实验研究

• 作者: 刘英鹏 李泽文 王国鹏 王建亭 龚树生
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒载体 细菌内同源重组 基因转移 Corti器 螺旋神经节
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 169-172
• 页数: 4页
• 分类号: R322.923|R322.85
• 字数: 3212字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-1520.2007.03.003

摘要

目的 构建携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒,观察GFP基因在体外培养的新生大鼠耳蜗Corti器和螺旋神经节细胞的表达.方法 通过细菌内同源重组方法构建携带有绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP),观察重组腺病毒转染培养的新生大鼠耳蜗Corti器和螺旋神经节细胞后,不同时间内绿色荧光蛋白基因的表达情况、表达部位及病毒对培养耳蜗Corti器和螺旋神经节细胞的影响.结果 构建的重组腺病毒经酶切电泳鉴定正确;荧光显微镜下观察腺病毒转染体外培养的新生大鼠耳蜗Corti器和螺旋神经节细胞后,12 h即开始表达绿色荧光蛋白基因,24 h达到高峰,表达时间可持续1周;倒置显微镜观察转染后的Corti器和螺旋神经节细胞形态结构及生长无明显改变.结论 本实验成功构建了携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒,通过该方法构建的腺病毒可以介导绿色荧光蛋白(GFP)基因在体外培养的新生大鼠耳蜗Corti器和螺旋神经节细胞中表达,但腺病毒本身对体外培养的耳蜗Corti器和螺旋神经节细胞生长无明显影响,为通过腺病毒进行内耳基因治疗提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚树生	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	90	506	11.0	18.0
2	刘英鹏	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	19	60	5.0	6.0
3	王国鹏	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	10	53	4.0	7.0
4	王建亭	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	10	17	3.0	3.0
5	李泽文	华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科	10	25	3.0	5.0