鹧鸪茶种质资源ISSR分子标记中的引物筛选

• 作者: 刘国民 宫庆龙 李娟玲 翟丽艳
• 来源期刊: 农业科学与技术（英文版）
• 学科: 农学
• 关键词: 鹧鸪茶 ISSR标记 引物筛选
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 40-43,46
• 页数: 5页
• 分类号: S5
• 字数: 615字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-4229-B.2009.06.014

摘要

[目的]为快速和准确地对鹧鸪茶种质材料进行ISSR分析提供有效引物.[方法]基因组DNA的提取采用改良的CTAB法:先用0.8%琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整性,EB染色,以Lambda DNA/Hind Ⅲ+Eco RⅠMarkers为参照,电泳结果用Gel Doc XR型凝胶成像分析系统下照相并记录.再用Biophotometer紫外分光光度计分别测定OD260和OD280,并计算出OD260/OD280值,每份样品的OD260/OD280比值均要求在1.8～2.0范围内.测定每份样品DNA浓度(ng/μl),并将其稀释至20 ng/μl,分装后置-20℃保存.利用99个ISSR引物,对来自海南岛境内的10个居群中共20份鹧鸪茶种质材料进行PCR扩增,以筛选出适合于所有鹧鸪茶种质材料ISSR分析的有效引物.[结果]从99个供试引物中共筛选出15个多态性丰富、条带清晰且可重复性良好的有效引物.用筛选出的15个引物对66份鹧鸪茶种质材料进行ISSR-PCR扩增,均可获得带型丰富和清晰可辨的DNA指纹图谱;15个引物共扩增出286条DNA谱带,其中231条为多态性带,占总扩增带数的80.77%,平均每个引物扩增出19.1条谱带.[结论]所筛选的15条引物可以有效地应用于鹧鸪茶种质资源材料的ISSR分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李娟玲	海南大学热带生物资源教育部重点实验室	46	260	7.0	14.0
5	刘国民	海南大学热带生物资源教育部重点实验室	71	594	14.0	21.0
9	翟丽艳	海南大学苦丁茶研究所	4	16	3.0	4.0
10	宫庆龙	海南大学苦丁茶研究所	3	14	3.0	3.0