不同分离及培养方法对大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖和生物学特性的影响

• 作者: 伍晓汀 张明鸣 杨平 程惊秋 贾贵清 陆燕蓉
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 间充质干细胞 细胞培养 细胞分离 骨髓 大鼠
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 719-723
• 页数: 5页
• 分类号: R331.2|Q2-33
• 字数: 4342字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2009.04.037

摘要

目的 探讨获得大量、高纯度、高活性骨髓间充质干细胞(BMSCs)的有效途径.方法 用密度梯度离心法和贴壁法分离纯化BMSCs,在无血清、含小牛或胎牛血清以及不同体积分数的胎牛血清的培养基中培养,传代扩增,观察各组细胞形态、生长特性,测定生长曲线,免疫细胞化学染色鉴定表面抗原,电镜观察细胞显微结构.结果 密度梯度离心法可获得较纯的原代细胞,但细胞增殖缓慢,容易老化;贴壁法分离的细胞生长增殖迅速,经传代换液,第4代细胞基本纯化;小牛和胎牛血清均能促进BMSCs生长增殖,但在体积分数为0.12的胎牛血清中集落形成率最高(46.50%);细胞表达CD44、CD90,而CD14、CD45阴性;电镜下BMSCs符合干细胞的一般特性.结论 经多次换液、严格控制传代消化时间(2～3 min)和酶浓度(2.5 g/L),采用贴壁纯化法在含体积分数为0.12的胎牛血清L-DMEM培养液中培养可获得大量、高纯度、高活性的BMSCs.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨平	四川大学华西医院胃肠外科	113	1678	19.0	36.0
2	张明鸣	四川大学华西医院胃肠外科	45	362	11.0	17.0
3	伍晓汀	四川大学华西医院胃肠外科	183	1410	21.0	30.0
4	程惊秋	四川大学华西医院卫生部移植工程与移植免疫重点实验室	48	304	9.0	15.0
5	贾贵清	四川大学华西医院胃肠外科	8	79	3.0	8.0
6	陆燕蓉	四川大学华西医院卫生部移植工程与移植免疫重点实验室	27	174	7.0	12.0