铜绿假单胞菌荧光实时定量PCR标准品的构建

• 作者: 吴道澄 孙飞龙 李君文 王新为 邱志刚 郭向飞 金敏
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 克隆 标准品 荧光实时定量PCR 检测
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 181-184,188
• 页数: 5页
• 分类号: Q93
• 字数: 3748字
• 语种: 中文

摘要

构建了荧光实时定量PCR标准品以检测水中的铜绿假单胞菌.利用所报道的铜绿假单胞菌gyrA基因为目的基因设计引物,通过培养细胞,煮沸法裂解细胞后做PCR,电泳,胶回收,然后与pMD19-T Vector连接并转化到感受态大肠杆菌中;氨苄青霉素筛选出白色菌落,菌落PCR及测序鉴定其特异性,根据OD值确定浓度,制备梯度浓度参考标准品,制作标准曲线,检测水样品中铜绿假单胞菌的菌量.