改良消化富集法提高精原干细胞富集效率的实验研究

• 作者: 吴永超 廖文彪 张茨 申复进 胡卫
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 精原干细胞 小鼠
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-13
• 页数: 3页
• 分类号: R321.1
• 字数: 2226字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2009.06.003

摘要

目的 建立一种改良的小鼠精原干细胞消化富集方法,为精原干细胞体外长期培养和移植奠定基础.方法 收集120个出生4～d BALB/c新生小鼠的睾丸,平均分为对照组和实验组,分别采用传统的两步消化法(对照组)和改良消化法(实验组)分离消化获得细胞悬液,并种植到铺有明胶的培养皿中,于种植后1h、5h、24h通过差速贴壁法去除体细胞,获得富集的精原干细胞.以Thy-1作为精原干细胞的表面标志,分别在3次差速贴壁前、后采用流式细胞仪检测Thy-1阳性细胞的比例,比较两组精原干细胞的富集效率.结果 实验组和对照组消化所获得的细胞数分别为(3.4±0.5)×105/睾丸和(3.6±0.3)×105/睾丸,无统计学差异(P＞0.05).然而,实验组细胞贴壁具有良好的活性,初次贴壁仅需40～50min,而对照组细胞需要4～5h甚至过夜培养才能贴壁.3次差速贴壁后,实验组Thy-1阳性细胞占睾丸细胞的比例为(56.3±4.7)%,而对照组仅为(32.6±4.2)%,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 改良消化富集法能明显提高睾丸细胞活性和富集效率,可获得大量高度纯化的精原干细胞,为精原干细胞培养和移植奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张茨	武汉大学人民医院泌尿外科	67	286	8.0	13.0
2	申复进	武汉大学人民医院泌尿外科	30	141	7.0	10.0
3	廖文彪	武汉大学人民医院泌尿外科	40	208	8.0	13.0
4	吴永超	武汉大学人民医院泌尿外科	1	0	0.0	0.0